Cy5是一种常见近红外荧光染料，发射波长约680 nm，荧光稳定性较好、穿透性较强，常用于生物检测和医学诊断研究。碘海醇是一种CT造影剂。Cy5-碘海醇纳米颗粒是将Cy5与碘海醇结合形成的复合体系，可实现荧光成像与CT成像互补，提高定性、定位观察的灵敏度和影像诊断的全面性、准确性，同时降低游离状态下可能的毒副作用。

Cy5-碘海醇荧光纳米颗粒样品

动态光散射是表征纳米颗粒粒径的常用手段。该样品荧光发射波长正好覆盖动态光散射光源波长，因此可在光路中使用窄带滤光片，过滤去除激光波长外的其他波长散射光，以最大限度限制荧光效应对粒径测试的影响。

图1.BeNano窄带滤光片微量池套件

本报告使用丹东百特BeNano 90 Zeta纳米粒度及Zeta电位分析仪，使用安装了窄带滤光片的去荧光微量池，检测分散在水性环境中的Cy5-碘海醇纳米颗粒粒径信息。

BeNano 90 Zeta纳米粒度及Zeta电位分析仪

原理和设备

BeNano 90 Zeta使用波长671 nm、功率50 mW激光器作为光源。动态光散射光路收集90°散射光，通过相关计算得到原始相关曲线信号，进而推导颗粒布朗运动速度，由斯托克斯-爱因斯坦方程得到颗粒粒径和粒径分布信息。

样品制备和测试条件

检测两个Cy5-碘海醇纳米颗粒样品，分别在原液状态下进行动态光散射测试。通过BeNano 90 Zeta内置温度控制系统，将测试温度控制为25℃±0.1℃，在90°角度测试。样品注入安装了窄带滤光片的荧光微量池，每个样品仅需16 μL。同时用常规样品池进行对比测试。每个样品放入样品池后至少测试三次，以检测结果重复性并得到标准偏差。

测试结果和讨论

图2.1#样品三次测试的相关曲线(上图)和粒径分布(下图)

图3.2#样品三次测试的相关曲线(上图)和粒径分布(下图)

图4.两个样品用常规PS样品池的相关曲线(1#上图，2#下图)

图2、图3分别为1#和2#样品三次测试的相关曲线和粒径分布。样品三次测试相关曲线重复性较好，粒径分布重复性较好，表明去荧光微量池能够消除荧光影响。

图4为两个样品用常规样品池测试的相关曲线。1#样品由于荧光信号影响，得不到合理相关曲线，未能看到相关曲线相关性衰减；2#样品相关曲线截距极低。两种情况都测不到粒径结果，间接表明去荧光微量池能有效避免荧光效应影响。

表1.两个样品的粒径测试结果

表1列出两个样品的粒径测试结果。两个样品粒径结果重复性较好，标准差较小，表明该类样品可使用去荧光微量池得到较好且接近真实的粒径结果。

丹东百特BeNano 90 Zeta配合窄带滤光片微量池，可为荧光纳米颗粒粒径表征提供有效方案。